數碼熒光顯微鏡是活體動物熒光成像技術的核心技術,廣泛應用于生物、工業檢測、司法和刑事等領域。它不僅是熒光防偽印刷檢測的重要工具,也是礦物研究的理想儀器。
數碼熒光顯微鏡觀察標本的制備要求有哪些?
1、載玻片
滑塊的厚度應在0.8到1.2mm之間。如果載玻片太厚,一方面會吸收更多的光,另一方面又不能使激發光聚集在標本上。載玻片必須光滑、厚度均勻且無明顯的自發熒光。石英玻璃有時用作載玻片。
2、蓋玻片
蓋板玻璃厚度約0.17mm,光滑。為了增強激發光,也可以使用干蓋玻璃。這是一種特殊的蓋板玻璃,涂有幾層物質(如氟化鎂),對不同波長的光有不同的干涉效應。它可以使熒光順利通過并反射激發光。這種反射的激發光可以激發樣品。
3、標本
組織切片或其他標本不應太厚。例如,大部分激發光被消耗在試樣的下部,而被物鏡直接觀察到的上部不能被充分激發。此外,單元重疊或雜質掩蔽可能會影響判斷。
4、封裱劑
甘油通常用作密封劑和封固劑。它必須是無色透明且無自發熒光的。熒光亮度在pH8.5-9.5之間明亮,不易快速褪色。因此,常用甘油與0.5mol/lph9.0-9.5碳酸鹽緩沖液等量混合作為密封劑。
5、鏡油
一般在用暗場數碼熒光顯微鏡和油鏡觀察標本時,必須使用鏡油。最好用專用的非熒光鏡片油,或者可以用上面的甘油代替,也可以用液體石蠟,但是折射率低,畫質稍受影響。